選購紫外可見分光光度計時要根據自己實驗室的需要和目的用途來考慮,主要考慮光學構造、光源、探測方法、樣品類型和數據處理等因素。
一、光學構造
一般來說,紫外可見分光光度計分為單光束和雙光束兩類。
顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進行測量,束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結果。
雙光束型則是通過一個斬光輪將束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品。可以小化光漂移和減少測量時間。有些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用種光束分光器來代替,將束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量些溶液隨時間動態變化的研究中大有用處。
二、光源和檢測方法
紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。鎢燈和鹵素燈般只覆蓋可見光部分(大約380 nm 到800 nm),而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區域。
分光光度計的光譜也是需要考慮的個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。
分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度,可以投射出實驗準確要求的光譜。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進行高分辨率的吸光測量,可變的單色儀的狹縫寬度能使臺分光光度計滿足多種實驗需要。
為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二管。PMTs提供快速的反應時間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調節至特定的范圍。
三、樣品類型
在大部分的樣品類型中,紫外分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量般從1 μl-5ml,并且些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現了柔韌性。