一、實(shí)驗(yàn)原理
淀粉是植物的主要能量貯藏物質(zhì)，主要存在于種子、塊根和塊莖中。除此外，淀粉在工業(yè)上的應(yīng)用也很廣泛。
將磨細(xì)的含淀粉樣品與酸性氯化鈣溶液共煮，可使樣品中淀粉輕度水解，同時(shí)由于鈣離子與淀粉分子上的羥基絡(luò)合，使淀粉分子充分地分散到溶液中，成為淀粉溶液。淀粉分子具有不對(duì)稱碳原子，因而具有旋光性，利用旋光儀測(cè)定淀粉溶膠的旋光度(α)，旋光度的大小與淀粉的濃度成正比，據(jù)此可以求出淀粉含量。
應(yīng)注意的是，酸性氯化鈣溶液必須保持pH 值2.30，密度1.30，加時(shí)間的長(zhǎng)短也要控制在一定范圍，以保證各種不同來源的淀粉溶液的比旋度［α］恒定不變(20℃)。樣品中其他旋光性物質(zhì)(如糖分)必須預(yù)先除去。
二、所需儀器、原料和試劑
樣品：植物樣品、面粉或其他風(fēng)干樣品
儀器：旋光儀及附件、粉碎機(jī)、離心機(jī)、電子分析天平、三角瓶、分樣篩(100目)、布氏漏斗、抽濾瓶及真空泵、離心管、小電爐。
試劑：
1.醋酸—氯化鈣溶液：
500g氯化鈣溶于600mL 蒸餾水中，過濾至澄清，用比重計(jì)在20℃條件下調(diào)節(jié)比重1.3左右，再滴加冰乙酸調(diào)pH 為2.3。
2.30％ZnSO4溶液
3.15％K4Fe(CN)溶液
三、操作步驟
1、樣品準(zhǔn)備
(1)稱樣脫脂：將樣品風(fēng)干、研磨，通過100目篩，精確稱取約2.5g樣品細(xì)粉(要求含淀粉約2g)，置于離心管內(nèi)，加乙醚數(shù)mL 到離心管內(nèi)，用細(xì)玻棒充分?jǐn)嚢瑁x心，傾出上清液，再加入乙醚如此操作數(shù)次，以去除樣品的大部分油脂、色素等成分(因油脂的的存在會(huì)使以后淀粉溶液的過濾困難)。
收集上清液以備回收乙醚。大多數(shù)谷物樣品含脂肪較少，可免去這個(gè)脫脂手續(xù)。
(2)抑制酶活性：加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到離心管內(nèi)，充分?jǐn)嚢瑁缓箅x心，傾去上清液，得到沉淀物。
(3)脫糖：加80％乙醇10mL 到離心管中，充分?jǐn)嚢枰韵礈斐恋砦?每次都用同一玻棒)，離心，傾去下清液。重復(fù)洗滌數(shù)次以去除可溶性糖分。
2、溶提淀粉
(1)加醋酸－氯化鈣：先用醋酸氯化鈣溶液約10mL 加到裝有脫脂樣品的離心管中，攪拌后全部?jī)A入250mL三角瓶?jī)?nèi)，再用醋酸氯化鈣溶液50mL分?jǐn)?shù)次洗滌離心管，洗滌液并入三角瓶?jī)?nèi)，攪拌玻棒也轉(zhuǎn)移到三角瓶?jī)?nèi)。
(2)煮沸溶解：先用蠟筆標(biāo)記液面高度，直接置于加有石棉網(wǎng)的小電爐上，在5min內(nèi)快速煮沸，保持沸騰15～17min，立即取下三角瓶，置流水中冷卻。煮沸過程中要時(shí)加攪拌并調(diào)節(jié)溫度，防止燒焦或泡沫涌出瓶外，必要時(shí)加水保持液面高度。
3、沉淀雜質(zhì)和定容
(1)加沉淀劑：將三角瓶?jī)?nèi)的水解液轉(zhuǎn)入100mL 容量瓶，用醋酸氯化鈣溶液充分洗滌三角瓶瓶，并入容量?jī)?nèi)，加30％ZnSO41mL 混合后，再加15％K4Fe(CN)1mL，用水稀釋至接近刻度時(shí)，加95％乙醇數(shù)滴以破壞泡沫，然后稀釋到刻度，混合、靜置，以使蛋白充分沉淀。
(2)過濾：布氏漏斗(加一層濾紙)抽氣過濾。先倒上清溶液約10mL 于漏斗濾紙上使完全濕潤(rùn)，待溶液流干后，棄去濾液，再倒溶液進(jìn)行過濾，用干燥的容器接受此濾液，收集約50mL，供測(cè)定之用。
4、測(cè)定旋光度
以空白液(乙酸—氯化鈣溶液：蒸餾水=6：4)調(diào)旋光儀零點(diǎn)，再將旋光測(cè)定管裝滿濾液，小心地按照旋光儀使用說明，進(jìn)行旋光度的測(cè)定。
四、計(jì)算
用工作曲線來求得淀粉含量。
（內(nèi)容來源物光網(wǎng)）
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