液相色譜儀檢測(cè)器的最早思路，一直是努力去除流動(dòng)相，來(lái)適應(yīng)氣相檢測(cè)器。但最終發(fā)現(xiàn)，液體和氣體之間的轉(zhuǎn)化非常麻煩，而且不夠穩(wěn)定。最終調(diào)轉(zhuǎn)了方向，發(fā)展出了和氣相幾乎完全不一樣的液相檢測(cè)器技術(shù)。
檢測(cè)器其實(shí)就是一個(gè)轉(zhuǎn)換器，它把化合物的物理性質(zhì)或者化學(xué)性質(zhì)，轉(zhuǎn)換成一個(gè)和這個(gè)理化性質(zhì)有關(guān)的電信號(hào)。每一種檢測(cè)器的使用要求，都和背后的原理有關(guān)。
1、紫外檢測(cè)器
最常見(jiàn)的紫外檢測(cè)器，就是根據(jù)化合物對(duì)紫外光的吸收能力，把濃度信息轉(zhuǎn)化為吸光度，再通過(guò)光電二極管，把光的信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，然后，被計(jì)算機(jī)收集和記錄。由于紫外吸收能力是一種非常穩(wěn)定的物理性質(zhì)，所以紫外檢測(cè)器也是一種非常穩(wěn)定的檢測(cè)器。
在有些標(biāo)準(zhǔn)方法中會(huì)使用254nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，那你們有沒(méi)有想過(guò)，為什么是這個(gè)數(shù)字呢？這和歷史的發(fā)展有關(guān)。在很長(zhǎng)一段時(shí)間里，紫外檢測(cè)器中使用的是低壓汞燈。而低壓汞燈的最大發(fā)射波長(zhǎng)，也就是汞的原子發(fā)射線是253.7nm，四舍五入，就是254nm。也就是說(shuō)，在這個(gè)波長(zhǎng)下，燈能量最高，靈敏度最好。然而現(xiàn)在，對(duì)于普遍使用氘燈的紫外檢測(cè)器，254nm其實(shí)并沒(méi)有特別的意義。
現(xiàn)在的分析方法，更多是考慮化合物的最大吸收波長(zhǎng)和避開(kāi)流動(dòng)相的干擾。紫外檢測(cè)器對(duì)于流動(dòng)相的要求是不要有紫外吸收的干擾。然而，完全沒(méi)有紫外吸收的有機(jī)溶劑是沒(méi)有的。所以為了把流動(dòng)相的干擾降到最小，通常測(cè)試波長(zhǎng)會(huì)避開(kāi)溶劑的截至波長(zhǎng)20nm以上。
氣泡的存在也會(huì)對(duì)吸光度的測(cè)定產(chǎn)生干擾，所以預(yù)防流通池里產(chǎn)生氣泡就很重要。一般的紫外檢測(cè)器會(huì)在出口加一條背壓管，產(chǎn)生一點(diǎn)點(diǎn)后壓，阻止氣泡的形成。
2、示差折光檢測(cè)器
示差折光檢測(cè)器RID，原理就是利用物質(zhì)的折光效應(yīng)。
折光和密度有關(guān)，當(dāng)化合物進(jìn)入流通池時(shí)，密度可能會(huì)比流動(dòng)相更大，也可能更小。所以示差折光檢測(cè)器既會(huì)出正峰，也可能出負(fù)峰。密度受溫度的影響特別大，所以示差檢測(cè)器是所有液相檢測(cè)器中，對(duì)檢測(cè)器保溫要求最高的。另外，不同的流動(dòng)相比例，密度肯定會(huì)不一樣，會(huì)引起基線的持續(xù)變化。因此示差折光檢測(cè)器不能使用梯度洗脫，只能用等度洗脫。
示差折光檢測(cè)器在液相分析中的地位，有點(diǎn)像氣相的熱導(dǎo)檢測(cè)器，都是利用折光或者熱導(dǎo)，這種非常普遍的物理性質(zhì)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，通用性好但靈敏度不太好。一般是濃度比較高，或者其他選擇性檢測(cè)器都沒(méi)有響應(yīng)的時(shí)候，才會(huì)使用。
3、熒光檢測(cè)器
熒光檢測(cè)器，顧名思義是用來(lái)檢測(cè)能產(chǎn)生熒光效應(yīng)的物質(zhì)。
自然界中能發(fā)射熒光的化合物是很少的，這既是缺點(diǎn)，更是優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)閬?lái)自于背景中的干擾會(huì)很小，靈敏度非常高。熒光檢測(cè)器對(duì)流動(dòng)相有一個(gè)特別的要求，就是要嚴(yán)格脫氣。這是由于氣泡中的氧氣會(huì)引發(fā)熒光猝滅效應(yīng)，造成峰面積大幅度下降。
4、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器ELSD，它利用的物理性質(zhì)是光散射效應(yīng)。
空氣中的顆粒越多，散射越明顯。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器通過(guò)霧化器等去除溶劑，讓化合物形成懸浮的顆粒，就像陽(yáng)光中漂浮的塵埃。所以它對(duì)溶劑是有要求的，不能使用不揮發(fā)的鹽類(lèi)，而要用醋酸銨之類(lèi)的揮發(fā)性緩沖鹽來(lái)替代。從原理上就可以看出，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器更適合分子量大的化合物，這樣才能形成更明顯的散射效應(yīng)。
（內(nèi)容來(lái)源色譜學(xué)堂）
