概述
據(jù)央視315晚會(huì)曝光，有的養(yǎng)殖戶和廠家將的黃色粉末狀藥物（喹乙醇）喂食給了動(dòng)物。喹乙醇長(zhǎng)期使用，會(huì)蓄積在動(dòng)物體內(nèi)，誘變細(xì)胞染色體畸形，此外還會(huì)造成耐藥性，給人類身體健康帶來(lái)潛在危害。
喹乙醇又稱喹酰胺醇，由于喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性，對(duì)大多數(shù)動(dòng)物有明顯的致畸作用，對(duì)人也有潛在的三致性，即致畸形，致突變，致癌。
因此喹乙醇在美國(guó)和歐盟都被禁止用作飼料添加劑。《中國(guó)獸藥典》(2005版)也有明確規(guī)定，喹乙醇被禁止用于家禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖。
本文主要介紹某飼料中喹乙醇的測(cè)定。
一、參考標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)原理
1、參考標(biāo)準(zhǔn)：GBT 8381.7-2009 飼料中喹乙醇的測(cè)定 高效液相色譜法
2、原理：飼料試樣中的喹乙醇經(jīng)過甲醇水溶液提取， PLS固相萃取小柱凈化，液相色譜C18色譜柱分離，紫外檢測(cè)器分析。
二、儀器與試劑
全自動(dòng)高通量柱膜通用固相萃取系統(tǒng)；二元高壓梯度高效液相色譜儀；恒溫振蕩器；高速離心機(jī)；
甲醇（色譜純FISHER Chemical）；鹽酸（分析純）；超純水（實(shí)驗(yàn)室制備）。
三、實(shí)驗(yàn)過程
1、標(biāo)準(zhǔn)貯備液配置
用容量瓶準(zhǔn)確配置喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液為100ug/mL，選用甲醇定溶。
2、飼料樣品處理
（1）提取
取5g飼料樣品于具塞錐形瓶中，加入50mL5%甲醇水溶液，放入振蕩器，恒溫振蕩45min，將提取液導(dǎo)入離心管，3500r/min離心10min，取上清液過0.45um濾膜過濾，等待全自動(dòng)固相萃取儀凈化。
（2）凈化
SPE柱活化：臨用前將3mL甲醇和3mL超純水分別以3mL/min過柱，注意不要讓萃取柱填料干涸；
上樣：取5mL提取液上清液液過柱，流速不大于3mL/min；
淋洗：用3mL淋洗液淋洗小柱，3mL/min，氮?dú)獯蹈?0秒；
洗脫：用2mL40%甲醇水溶液以3mL/min洗脫并收集，氮?dú)獯蹈?0秒。
（3）樣品加標(biāo)處理
將提取樣品的上清液，加標(biāo)后樣品濃度10ug/mL，用來(lái)測(cè)定全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)加標(biāo)回收率。
四、實(shí)驗(yàn)分析
1、液相色譜條件
色譜柱：Labtech C18（250×4.6 mm，5 μm）
流動(dòng)相：甲醇 : 水=15 : 85
流速：1.0 mL/min
柱溫：30 ℃
檢測(cè)器：UV 260 nm
2、定量測(cè)定
將10ug/mL喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)液相色譜分析，查看色譜圖，查看飼料樣品提取液空白液相色譜分析圖、飼料樣品提取液加標(biāo)濃度10ug/mL色譜圖。
3、樣品加標(biāo)回收率結(jié)果
表1樣品加標(biāo)10ug/mL回收率
回收率，% | 平均值，% | RSD，% | ||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |||
喹乙醇 | 93.1 | 95.3 | 92.2 | 94.1 | 96.3 | 90.9 | 93.7 | 2.1 |
五、結(jié)論與討論
本方法使用全自動(dòng)高通量柱膜通用固相萃取系統(tǒng)凈化飼料中喹乙醇回收率在90.9%~96.3%，RSD為2.0%。
結(jié)果比較理想，驗(yàn)證樣品加標(biāo)濃度在10ug/mL回收率可靠，實(shí)驗(yàn)可行，避免人工操作繁瑣的問題。
注：本文僅代表個(gè)例，不具有普適性，僅作為方法探討。
（內(nèi)容參考儀器信息網(wǎng)）
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