一、原理
二氧化硫被四氯汞鈉吸收液吸收后,生成穩定的絡合物,再與甲醛和鹽酸副玫瑰苯胺作用,并經分子重排后,生成紫紅色的絡合物。顏色的深淺與二氧化硫的濃度成正比,可以比色測定。
二、儀器及試劑
儀器:分光光度計
(1)四氯汞鈉吸收液:稱取氯化汞(HgCl2)27.2,氯化鈉11.7克,溶于水中并稀釋至1000毫升,放置過夜,過濾后使用。
(2)顯色劑:融解鹽酸福玫瑰苯胺100毫克于200毫升水中,加40毫升濃鹽酸,定容至500毫升,置于棕色瓶中。
(3)2%甲醛溶液:吸取37-40%甲醛5毫升于水中,并稀釋至100毫升。
(4)1%淀粉指示劑。
(5) 冰醋酸。
(6) 蛋白質沉淀劑。
a)飽和硼砂溶液:溶解約25克硼砂于500毫升水中.
b)硫酸鋅溶液溶解150克硫酸鋅于500毫升水中。
(7)0.1N碘溶液。
(8)0.1N硫氏硫酸鈉標準溶液。
(9) 二氧化硫標準溶液:稱取0.5克亞硫酸氫鈉溶于200毫升四氯汞鈉吸收液中,放置過夜。上清液用定量濾紙過濾備用,按下法進行標定。
取10毫升亞硫酸氫鈉四氯汞鈉溶液于250毫升碘價瓶中,加水100毫升,加入0.1N碘溶液20毫升,冰醋酸5毫升,搖勻,用0.1N硫代硫酸鈉溶液滴定到淡黃色,加入1%淀粉指示劑5-6滴,繼續滴定至無色。空白試驗于250毫升碘價瓶中加A300毫升水,按上述步驟同樣操作。
SO2(毫克/毫升)=(V1-V2)/10×N×32.03
V1;空白消耗硫代硫酸鈉標準溶液的量(m1)
V2:標準消耗硫代硫酸鈉標準溶液的量(m1)
N:硫代硫酸鈉標準溶液的當量濃度
三、操作方法
(1) 樣品處理:稱取經搗碎蘑菇樣品20克,加入飽和硼砂溶液5毫升,硫酸鋅2毫升,攪拌均勻,移入100毫升容量瓶中,加水至刻度。過濾,濾液供測定用(濾液必須澄清,否則要重復過濾數次)。
(2) 標準曲線的繪制:吸取每毫升相當于2微克的二氧化硫標準溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升于25毫升比色管中,各加入2%甲醛溶液1毫升,顯色劑1毫升,另分別依次加入10、9、8、7、6、5毫升吸收液,混勻,靜置15分鐘,于分光光度計580毫微米波長下測定
(3) 樣品分析:吸取濾液5毫升,加人吸收劑5毫升,2%甲醛溶液1毫升,顯色劑1毫升,混勻,靜置15分鐘,于分光光度計580毫微米波長下測定光密度。根據測得的光密度,從標準曲線查得相應的二氧化硫的含量。
四、計算
S02:(毫克/公斤)=C/W×1000
C;相當于標準的量(毫克)。
W:測定時所取樣品溶液相當于樣品的量(克)。
五、注意事項
(1)最適反應為20-25℃,溫度低靈敏度低,故標準管與樣品管需在相同溫度下顯色。
(2)溫度為15-16℃,放置時間需延長為25分鐘,顏色穩定20分鐘。
(3)鹽酸副玫瑰苯胺中的鹽酸用量對顯色有影響,加人鹽酸量多,顯色淺,加入量少,顯色深,所以要按操作進行。
(4) 甲醛濃度在0.15-0.25%時,顏色穩定,故選擇0.2%甲醛溶液。
(5) 顏色較深的樣品,可用l0%活性炭脫色。
(6) 測定粉絲,粉條中的二氧化硫時,樣品要浸泡30分鐘。
(7) 樣品加入四氯汞鈉吸收液于100毫升容量瓶中,加水至刻度,搖勻。此溶液中的二氧化硫含量在24小時之內很穩定。