一.按使用波長范圍劃分
可分為可見分光光度計和紫外可見分光光度汁兩類。前者使用的波長范圍為400~780nm,后者使用的波長范圍為200~400nm。
二.按光路劃分
可分為單光束式及雙光束式兩類。
所謂單光束是指從光源中發出的光,經過單色器等一系列光學元件及吸收池后,最后照在檢測器上時始終為一束光。常用的單光束紫外可見分光光度計有UV1600型、UV1600PC 型、UV1800PC型等。
單光束分光光度計的特點是結構簡單,主要適于作定量分析。
雙光束分光光度計是指從光源中發出的光經過單色器后被一個旋轉的扇形反射鏡(即切光器)分為強度相等的兩束光,分別通過參比溶液和樣品溶液。利用另一個與前一個切光器同步的切光器,使兩束光在不同時間交替地照在同一個檢測器上,通過一個同步信號發生器對來自兩個光束的信號加以比較,并將兩信號的比值經對數變換后轉換為相應的吸光度值。
雙光束分光光度計的特點是能連續改變波長,自動地比較樣品及參比溶液的透光強度,自動消除光源強度變化所引起的誤差。對于必須在較寬的波長范圍內獲得復雜的吸收光譜曲線的分析,此類儀器極為合適。
三.按測量時提供的波長數劃分
可分為單波長分光光度計和雙波長分光光度計兩類。
雙波長分光光度計與單波長分光光度計的主要區別在于采用雙單色器,以同時得到兩束波長不同的單色光。光源發出的光分成兩束,分別經兩個可以自由轉動的光柵單色器,得到兩束具有不同波長A1和A2的單色光。借切光器,使兩束光以一定的時間問隔交替照射到裝有試液的吸收池上,由檢測器顯示出試液在波長λ1和λ2的透射比差值△r或吸光度差值△A,則△A=Aλ1-Aλ2=﹙Eλ1-Eλ2)bc。由式可知,△A與吸光物質c成正比。這就是雙波長分光光度進行定量分析的理論根據。
這類儀器特別適合混合物和渾濁樣品的定量分析,準確度高,可進行導數光譜分析等。