一.分光光度法
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,從而對該物質進行定性和定量分析。
常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區(2)400~760nm的可見光區(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。
二.分光光度計
分光光度計是精密光學儀器,分為紫外可見分光光度計、可見分光光度計(或比色計)、原子吸收分光光度計(或紅外分光光度計)。
正確安裝、使用和保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度有重要作用。除此外為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程規定,定期進行校正檢定。
三.分光光度計對工作環境的要求
①儀器應安放在干燥的房間內,使用溫度為5~35℃.相對濕度不超過85%。
②儀器應放置在堅固平穩的工作臺上,且避免強烈的振動或持續的振動。
③室內照明不宜太強,且應避免直射日光的照射。
④電扇不宜直接向儀器吹風,以防止光源燈因發光不穩定而影響儀器的正常使用。
⑤盡量遠離高強度的磁場、電場及發生高頻波的電器設備。
⑥供給儀器的電源電壓為AC220V±22V,頻率為50Hz±1Hz,并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩壓器或交流恒壓穩壓器,以加強儀器的抗干擾性能。
⑦避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場所使用。
四.分光光度計的日常維護和保養
①光源。
光源的壽命有限,為了延長光源使用壽命,在不使用儀器時不要開光源燈,應盡量減少開關次數。在短時問的工作間隔內可以不關燈。剛關閉的光源燈不能立即重新開啟。
儀器連續使用時間不應超過3h。若需長時間使用,最好間歇30min。
如果光源燈亮度明顯減弱或不穩定,應及時更換新燈。更換后要調節好燈絲位置,不要用手直接接觸窗口或燈泡,避免油污沾附。若不小心接觸過,要用無水乙醇擦拭。
②單色器。
單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內,不能拆開。選擇波長應平衡地轉動,不可用力過猛。為防止色散元件受潮生霉,必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發現干燥劑變色,應立即更換。
③吸收池。
必須正確使用吸收池,應特別注意保護吸收池的兩個光學面。
④檢測器。
光電轉換元件不能長時間曝光,且應避免強光照射或受潮積塵。
⑤當儀器停止工作時,必須切斷電源。
⑥為了避免儀器積灰和沾污,在停止工作時,應蓋上防塵罩。
⑦儀器若暫時不用要定期通電,每次不少于20~30min,以保持整機呈干燥狀態,并且維持電子元器件的性能。